九
、RT-PCR
RT-PCR是將RNA的反轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術
。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成
cDNA
，再以cDNA為模板
，擴增合成目的片段
。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行
。在兩步法RT-PCR中
，每一步都在佳條件下進行
。
實驗步驟
：
1
、RNA的提取
；
2
、反轉錄合成cDNA
；
3
、PCR擴增
；
4
、產物的電泳和結果的測定
。
十
、實時熒光定量PCR（Q—PCR）（Real-time
Quantitative PCR ）
利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴增反應中每一個循環擴增產物量的變化
，通過Ct值和標準曲線的關係對起始模板進行定量分析
。
閾值
：是循環開始3～15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍
，設定在擴增曲線指數增長期
。
C(t)值
：熒光信號（擴增產物）到達閾值時所經過的擴增循環次數
。
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