二十六
、雙向凝膠電泳（2-DE）
雙向凝膠電泳的原理是第一向基於蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離
，第二向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離
，把複雜蛋白混合物中的蛋白質在二維平麵上分開
。
二十七
、mRNA的分離與純化（寡聚(dT)纖維素柱純化mRNA）
真核細胞的mRNA分子顯著的結構特征是具有5’端帽子結構（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴
。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly（A）尾
，通常用Poly（A+）表示
。這種結構為真核mRNA的提取
，提供了極為方便的選擇性標誌
，寡聚（dT）纖維素或寡聚（U）瓊脂糖親合層析分離純化mRNA的理論基礎就在於此
。
mRNA的分離方法較多
，其中以寡聚（dT）-纖維素柱層析法為有效
，已成為常規方法
。此法利用mRNA
3’末端含有Poly（A+）的特點
，在RNA流經寡聚（dT）纖維素柱時，在高鹽緩衝液的作用下
，mRNA被特異地結合在柱上
，當逐漸降低鹽的濃度時或在低鹽溶液和蒸餾水的情況下
，mRNA被洗脫
，經過兩次寡聚（dT）纖維柱後
，即可得到較高純度的mRNA
。
二十八
、His-tag純化蛋白
His•Tag序列（6、8或10個連續的組氨酸殘基）與固定在基於NTA(氮川三乙酸鎳)
-和IDA-
的His•Bind樹脂上的二價陽離子Ni2+結合
。洗去未結合蛋白後
，用咪唑或稍低的pH洗脫並回收目標蛋白
。該通用係統使得可在溫和
、非變性條件
，或存在6M胍或尿素條件下純化蛋白
。
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