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2014受歡迎的PCR方法相關論文
作者 :致富彩票生物   發表時間 :2014-12-16
今天,Biotechniques網站介紹了2014年在該網站發表的5篇有趣和有用的PCR方法相關文章 。

PCR是現代分子生物學中的一種基本技術 ,所以它的任何創新或改進都受到研究人員的極大歡迎 。BioTechniques的編輯們一直都非常喜歡PCR方法 ,致富彩票很高興看到 ,2014年帶來了新技術的強大選擇 。在這裏 ,致富彩票介紹了在過去一年中發表的5篇PCR方法相關論文 ,範圍很廣 ,從基本老式PCR反應有效性和特異性的改進 ,到尖端技術如數字PCR 。


1 、 一種強大的耐熱DNA聚合酶鏈置換活性可顯著改善DNA擴增結果

誰不喜歡一種多功能的工具呢 ?當你可以用有些奇怪但很方便 、孩子喜歡的叉勺時 ,為什麽還去用勺子和叉子呢 ?在8月刊的BioTechniques ,Ignatov等人描述了DNA聚合酶的叉勺等價物 ,一種可用於常規PCR反應以及等溫擴增的DNA聚合酶 。直到現在 ,這兩種擴增方法還需要非常不同類型的DNA聚合酶 :對於PCR來說 ,一種耐熱DNA聚合酶(如Taq酶) ,可以經受住每一個PCR循環中的熱變性步驟 ;對於等溫擴增來說 ,一種DNA聚合酶如Bst ,具有很強的鏈置換活性 ,使DNA鏈分開而代替熱變性 。Ignatov和同事們證明 ,一種新型Taq DNA聚合酶突變體 ,具有很強的鏈置換活性 ,稱為SD DNA聚合酶 ,不僅可用於PCR和環介導等溫擴增法(LAMP)以及近描述的聚合酶鏈置換反應方法 ,而且能夠改善靈敏度和效率 ,即使在困難的情況下 ,例如長片段PCR或GC富集模板的擴增 。這種多用途的新型DNA聚合酶應該是對DNA擴增酶工具箱的一種受歡迎的補充 。


2、 牛凝血酶可提高聚合酶鏈式反應的效率和特異性

當PCR不能正常工作 ,或產生非特異性擴增產物和引物二聚體而不是預期的擴增子時 ,這是非常令人沮喪的 。多年來 ,研究人員已經在PCR反應中添加了許多化合物 ,以提高DNA擴增的特異性和效率 。這些添加物範圍很廣 ,從小的有機分子(例如甘油和甜菜堿)到非離子型洗滌劑(如Triton X-100和Tween ,到蛋白質如BSA) 。不幸的是,每一種添加物隻在一組特定的條件下改善PCR擴增結果 。真正理想的狀態是 ,一種PCR增強劑在盡可能多的不同情況下都可以起作用 ,Xi

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