在WB過程中從SDS-PAGE膠上轉移蛋白至膜上是非常關鍵的步驟
！優化轉移時間往往需要實驗多次
，下麵就講幾條關於如何保證蛋白完全轉移的小技巧
，適合新手參考:
使用預染的marker 預染marker不僅能夠直觀的觀察到跑膠情況
，而且在轉移過程中也是很好的工具
，在完成印跡後觀察膜上的 marker
，看是否所有條帶都已經轉移至膜上
。
在轉印裝置中加兩塊膜 小分子量的蛋白轉移的比較快
，而為保證大分子蛋白的轉印
，長時間的轉印可能使小分子蛋白透過膜
，因此
，可以加入兩塊膜
，如果能在第二塊膜上檢測到小分子蛋白
，說明轉印時間過長
。
在轉印後對膠染色 如果轉印時間不夠優化
，通過對膠染色
，在膠上能夠觀察到未轉移完全的蛋白
，這種情況在轉印大分子蛋白是常見
，使用銀染或者考馬斯亮藍的方法都可以
。
二
、Western blot轉印的優化
從SDS凝膠中進行Western蛋白轉印的優化需要對一係列參數進行考慮
。目的是轉印所有凝膠上的蛋白並將其定 |
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